PROTOKOL PRESIPITASI

PROTOKOL PRESIPITASI

                Setelah dilakukan cycle sequencing, maka sebelum dikirim ke cornel university, kita harus melakukan presipitasi, yaitu :

1.       Siapkan plate 96 yang berisi produk cycle sequencing kita. Buka dan buang penutupnya.

2.       Tambahkan 48 μL isopropanol pada masing-masing tube yang ada dalam Plate, kemudian tutup dengan penutup karet dan sentrifuge menggunakan micro sentrifuge pada kecepatan 220 4 rcf. Selama 30 menit. Akan tetapi jangan menyeting waktu di program sentrifuge. Hanya dengan menggunakan stopwatch. Jangan lupa untuk menyeimbangkan posisi plate dalam microsentrifuge. Gunakan 1 plate kosong sebagai penyeimbang. Demikian pula untuk semua tahap sentrifuge yang ada selanjutnya.

3.       Setelah 30 menit, stop mesin dan buka, dan juga buka penutup plate. Buang semua isoproponal dengan membalik plate diatas tissue towel. Pastikan semua isopropanol hilang, yaitu dengan cara menutup plate dengan menggunakan tissue kemudian dientrifuge kembali dengan kecepatan yang sama dalam waktu 1 menit.

4.       Setelah itu pastikan kembali, tidak tercium bau isopropanol. Jika masih tercium, ulang kembali sentrifugasi.

5.       Selanjutnya, tambahkan 40 μL Ethanol 70% dalam setiap tube. Kemudian tutup kembali dengan penutup karet dan sentrifuge selama 30 menit.

6.       Stop kembali sentrifuge, dan buka serta buang kembali ethanolnya. Tutup dengan tisu dan sentrifuge selama 1 menit untuk memastikan semua ethanol hilang. Pastikan kembali tidak tercium bau ethanol. Jika masih tercium, ulang sentrifuge lagi.

7.       Setelah itu, tutup palte dengan menyelimutinya menggunakan tisu, dan biarkan selama 30 menit.

8.       Setelah itu, tulis nomor order yang diperoleh pada saat mengaploud data sampel dan mengorder sequencing ke cornel university.

9.       Terakhir tutup rapat dengan alumunium foil, dan simpan ditempat gelap.