PROTOKOL PEMBUATAN CHILEX 10%

PROTOKOL PEMBUATAN CHILEX 10 %

Sebelum melakukan pembuatan chilex, perlu diketahui bahwa ekstraksi ini merupakan tahap awal proses isolasi DNA. Oleh karena itu, kita harus berhati-hati sehingga terhindar dari kontaminasi. Selain itu, pastikan bahwa semua peralatan dan bahan yang kita gunakan benar-benar steril dan bebas dari DNA organism apapun. Adapun prosedur lengkapnya yaitu :

1. Siapkan semua alat-alat berikut ini : Pipet micro 1000 µL, maghnetic stirrer, bar stirrer, tabung ependrof 0,7 uL, tips untuk  pipet 1000 µL, gelas piala, rak tabung, toples penyimpanan chelex.
2. Letakkan semua alat tersebut dalam laminarflow, tutup dan nyalakan lampu UV selama  lima belas sampai tiga puluh menit. Setelah itu matikan lampu UV dan nyalakan lampu biasa.
3. Timbang chelex sebanyak 10 gram, kemudian masukan dalam gelas piala.
4. Tambahkan air molekuler hingga volumenya mencapai 100 mL (jika anda bekerja dengan labu ukur, jika tidak anda cukup menambahkan molecular grade water sebanyak 100 mL), dan masukan bar stirrer serta aduk menggunakan magnetic stirrer sampai benar-benar tercampur.
5. Semua proses pembuatan chelex ini dilakukan didalam laminar flow kecuali penimbangan.
6. Siapkan tabung eppendroff di rak tabung, sehingga memudahkan dalam pengisian.
7. Sambil tetap diaduk menggunakan magnetic stirrer, ambil 300 µL larutan chilex, masukan kedalam tabung eppendroff, dan tutup tabung serta masukan dalam toples tempat penyimpanan stok chilex.
8. Ulangi langkah tujuh, sampai semua chilex yang kita buat telah masuk dalam tabung eppendrof. Jika kita membuat larutan sebanyak 100 mL kemungkinan kita akan mendapatkan sekitar 333 tabung chelex siap pakai.
9. Setelah itu, simpan chilex dalam kulkas. Untuk melakukan ekstraksi anda bisa lihat pada protocol ekstraksi chelex.